BioMax TranScreen 说明

样品准备

一般来说,准备用于放射自显影技术的样品应该得到彻底干燥,以尽量减少 β 射线的衰减。将湿的印迹或样品放入保鲜膜或袋子里的程序会严重降低灵敏度和分辨率,特别是在使用能量较低的同位素(如 35S)时,并会完全消除有效的 3H 检测。此外,重要的是,实验中使用的任何印迹材料对印迹生物分子具有最大的亲和力;例如,带正电荷的尼龙之于核酸。对薄膜的正确选择保证了放射性最接近表面(确定印迹的活性面),该表面可置于最接近胶片和荧光粉的地方,以最大限度地提高灵敏度和空间分辨率。

是否能够保证印迹在干燥后能够剥离和重新探测以使用放射自显影技术是令人担忧的问题。一般来说,如果印迹分子与薄膜有适当的交联,并且印迹被适当地阻止和探测,干燥后的剥离和再探测不会受到不利影响。

风干的简单操作定义足以用于 BioMax TranScreen,而如果印迹暴露在胶片表面,最轻微的湿气也会造成严重的粘连和/或静电问题。BioMax TranScreen 的表面能有效地规避水和/或冰对荧光粉的不利影响。

暗室和安全灯

重要信息:BioMax MS 胶片对绿色、黄色和蓝色的光线非常敏感,只能在红色 GBX-2 安全灯滤光器、7.5 或 15 瓦的灯泡下曝光。使用其他安全灯滤光器或更高功率的灯泡将导致曝光的胶片上的背景灰雾明显增加。请参考随胶片提供的使用说明和预防措施。BioMax TranScreen 在无限期曝光中表现稳健。此外,荧光粉曝光后的发光时间足够短(几秒钟),因此不需要采取涉及屏幕黑暗适应的特殊预防措施。

BioMax TranScreen 系统的使用说明

步骤 1. 在适当的暗室条件下,从盒子里取出胶片,并将其插 入BioMax TranScreen 胶片夹。BioMax TranScreen 胶片夹旨在帮助减少因暗室条件不佳而造成的胶片起雾。请参考暗室和安全灯部分,了解适当的暗室条件。

步骤 2. 如图所示,将样品的活性面放在胶片夹的荧光粉表面上。

步骤 3. 将胶片/屏幕组合放入暗盒,并关闭暗盒。

步骤 4. 然后应将暗盒放入冰柜(-60 至 -80˚C)。使用冰柜很重要,可以使系统的灵敏度最大化。

步骤 5. 曝光后,让暗盒升温至室温至少 15 分钟后,再打开暗盒。这将有助于防止损坏暗盒的铰链,并尽量减少曝光的胶片、样品和 BioMax TranScreen 增感屏上形成的冷凝水。

步骤 6.在适当的暗室条件下,打开暗盒,拆开之前构造的夹层。BioMax TranScreen 胶片夹的一角有缺口,方便取用胶片。